一、细胞样本:1、贴壁细胞收集:细胞弃培养上清,预冷PBS轻柔洗涤保证完全去除培养基。加少量预冷的PBS用细胞刮刀将细胞收集于冻存管,4℃1500rpm离心去除上清后得到细胞,置于液氮速冻,-80℃冰箱保存。2、悬浮细胞收集:将培养完成的细胞,转移至EP管,1000rpm离心5分钟,弃上清,4℃1500rpm离心5min去除上清后得到细胞,..
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一、细胞样本:
1、贴壁细胞收集:
细胞弃培养上清,预冷PBS轻柔洗涤保证完全去除培养基。加少量预冷的PBS用细胞刮刀将细胞收集于冻存管,4℃1500rpm离心去除上清后得到细胞,置于液氮速冻,-80℃冰箱保存。
2、悬浮细胞收集:
将培养完成的细胞,转移至EP管,1000rpm离心5分钟,弃上清,4℃1500rpm离心5min去除上清后得到细胞,置于液氮速冻,-80℃冰箱保存。
3.细胞上清:标本于2-8℃ 3000rpm离心15分钟取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存,避免反复冻融 。
二、动物组织
使用预冷的PBS(pH=7.0-7.4)溶液洗涤组织,尽量洗去残存血液(裂解的红细胞会影响测量结果准确性),称重后将组织剪碎,按1:9的质量体积比(即1 g组织加入9 mL溶液)加入PBS溶液,采用玻璃匀浆器充分研磨。后将匀浆液转入离心管中,5000 g离心10分钟,取上清立即检测,或将上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存,但应避免反复冻融。
三、血清
使用血清分离管收集全血标本,室温(约25 ℃)放置2小时或4 ℃冰箱放置过夜, 3000转离心10分钟或1000 g离心20分钟,取上清立即检测,或将上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
四、血浆
用EDTA或肝素抗凝管采集血液标本,在4 ℃条件下3000转离心20分钟或1000 g离心15分钟,取上清立即检测,或将上清置于-20 ℃或-80 ℃冰箱保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测

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