ELISA试剂盒出现显色淡灵敏度偏低可能原因及解决方法

发布时间：2025-03-05 热度：128

我们在做实验时，常会遇到elisa试剂盒显色淡灵敏度偏低的问题，以下是根据不同问题可能原因及解决方法，仅供参考。

1．孵育反应时间不足定时钟准确定时 。

2．洗涤时冲击力太大，洗涤液浸泡时间太长，洗涤次数增加。

减少洗涤冲击力，按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数。

3．显色剂滴加量不足或顺序颠倒，或混合后加入滴加显色液时，滴瓶垂直向下，持力均 

匀，滴速不宜过快，先加显色剂 A，再加显色剂B，不可将A、B液混合后加入。

4．显色剂反应时间不足准确定时。

5．蒸馏水水质有问题

测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响。

6．elisa试剂盒在运输途中时间太长，温度太高

试剂盒置保温箱内运输，并放足够数量的冰块，尽量缩短运输时间。

7．试剂、样品用前未能平衡

用前试剂、样品置室温平衡 30分钟左右。

8．样品和NaN 3 防腐，抑制了酶的反应

样品不能加 NaN 3 防腐。

9．试剂盒超过有效期

超过效期试剂盒不要使用。

10．试剂开启时间过长长菌

试剂开启后请尽量在短时间内用完。

11．移液器吸量不足，移液抽吸排放太快，吸头内壁挂液太多或内壁不清洁

校正移液器，吸头要配套，每次装吸头要吻合紧密。移液不宜过快，排放应完全。吸 

头内壁要清洁，一次性使用。

12．elisa试剂盒恒温箱温度不足37℃或水浴锅水温度不足37℃）

放入反应板时注意培养箱温度，及时调整，孵育反应期间开启不宜太多，影响温度平衡。